Crio-Microscòpia electrònica
- Tècniques de preparació de mostres:
- Fixació i inclusió de mostres a temperatura ambient: tècnica convencional.
- Criofixació: alta pressió, impacte, immersió en propà o età.
- Criosubstitució i crioinclusió.
- Criofractura, Crioassecatge i ombrejats metàl·lics.
- Ultramicrotomia: semifins, ultrafins tot tipus de resines.
- Crioultramicrotomia: criopreparació i criotalls.
- Crioultramicrotomia de mostres vítries (vitreous cryo-sectioning).
- Tècniques de tinció i marcatge:
- Tinció negativa i contrast.
- Inmunomarcatges.
- Hibridació in situ.
- Autoradiografia.
- Tècniques d’observació i anàlisi:
- Microscòpia electrònica de transmissió temperatura ambient (100 kv – 120 kv)
- Criomicroscòpia electrònica (200 kv FEG)
- Tomografia i Crio-tomografia electròniques (+70º/-70º single axis)
- Reconstrucció tridimensional
- Tècniques de microscòpia òptica:
- Inclusió en parafina.
- Microtomia de parafina.
- Hibridació in situ.
- PCR in situ.
- Ultraestructura convencional de cèl·lules senceres i teixits.
- Ultraestructura convencional de partícules aïllades, orgànuls aïllats o petits organismes.
- Ultraestructura d’alta preservació de cèl·lules, teixits i mostres particulades o petits organismes, mitjançant talls. Diversos graus de preservació i visualització.
- Estudi de l’organització de partícules intramembrana.
- Caracterització nanomètrica topogràfica i/o de l’interior de compostos lipo/lipoproteics, proteïnes, assemblatges de proteïnes, membranes i biomaterials.
- Reconstrucció tridimensional d’estructures aïllades o particulades.
- Reconstrucció tridimensional d’estructures (macromolècules, nanomàquines o cossos subcel·lulars) in situ, a l’interior de la cèl·lula.
- Reconeixement molecular, o localització in situ a nivell subcel·lular, de proteïnes, àcids nucleics i altres macromolècules.
- Estudis quantitatius de mesures o marcatges a escala nanomètrica.
- Preparació bàsica per a microscòpia òptica de transmissió.
- Estudi de l’estructura 3D de proteïnes o complexes macromoleculars.
- Estudi de l’estructura en 3D d’estructures cellulars.
- Caracterització de liposomes, micel·les, bicel·les o altres partícules lipoproteiques. Efecte de tensioactius. Interacció d’aquests compostos amb material biològic com vehicles de drogues.
- Estudi de nanopartícules amb pèptids, proteïnes, etc. i la seva possible entrada a cèl·lules tumorals o a través de la pell, mucoses, barrera hematoencefàlica…
- Estudi de cèl·lules o biomolècules funcionalitzades sobre substrats nanoestructurats.
- Estudis 3D de proteïnes d’interès farmacològic com a dianes de drogues.
- Caracterització d’hidrogels de pèptids.
- Estudi ultraestructural de models biològics de malalties, per exemple, paràsit de la malària infectant l’eritròcit o canvis estructurals en cèl·lula tumoral…
- Estudi dels canvis ultraestructurals provocats a les cèl·lules per assaigs amb drogues o modificacions genètiques vàries.
Enllaços d'interès: