Crio-Microscopía electrónica
- Técnicas de preparación de muestras:
- Fijación y inclusión de muestras a temperatura ambiente: técnica convencional.
- Criofijación: alta presión, impacto, inmersión en propano o etano.
- Criosubstitución y crioinclusión.
- Criofractura, Criosecado y sombreados metálicos.
- Ultramicrotomía: semifinos, ultrafinos todo tipo de resinas.
- Crioultramicrotomía: criopreparación y criocortes.
- Crioultramicrotomía de muestras vítreas (vitreous cryo-sectioning).
- Técnicas de tinción y marcaje:
- Tinción negativa y contraste.
- Inmunomarcajes.
- Hibridación in situ.
- Autoradiografía.
- Técnicas de observación y análisis:
- Microscopía electrónica de transmisión temperatura ambiente (100 kv – 120 kv)
- Criomicroscopía electrónica (200 kv FEG)
- Tomografía y Crio-tomografía electrónicas (+70º/-70º single axis)
- Reconstrucción tridimensional
- Técnicas de microscopía óptica:
- Inclusión en parafina.
- Microtomía de parafina.
- Hibridación in situ.
- PCR in situ.
- Ultraestructura convencional de células enteras y tejidos.
- Ultraestructura convencional de partículas aisladas, orgánulos aislados o pequeños organismos.
- Ultraestructura de alta preservación de células, tejidos y muestras particuladas o pequeños organismos, mediante cortes. Diversos grados de preservación y visualización.
- Estudio de la organización de partículas intramembrana.
- Caracterización nanométrica topográfica y/o del interior de compuestos lipo/lipoprotéicos, proteinas, ensamblajes de proteinas, membranas y biomateriales.
- Reconstrucción tridimensional de estructuras aisladas o particuladas.
- Reconstrucción tridimensional de estructuras (macromoléculas, nanomáquinas o cuerpos subcelulares) in situ, en el interior de la célula.
- Reconocimiento molecular, o localización in situ a nivel subcelular, de proteinas, ácidos nucléicos y otras macromoléculas.
- Estudios cuantitativos de medidas o marcajes a escala nanométrica.
- Preparación básica para microscopía óptica de transmisión.
- Estudio de la estructura 3D de proteinas o complejos macromoleculares.
- Estudio de la estructura en 3D de estructuras celulares.
- Caracterización de liposomas, micelas, bicelas o otras partículas lipoproteicas. Efecto de tensioactivos. Interacción de estos compuestos con material biológico como vehículos de drogas.
- Estudio de nanopartículas con péptidos, proteínas, etc. y su posible entrada a células tumorales o a través de la piel, mucosas, barrera hematoencefálica…
- Estudio de células o biomoléculas funcionalizadas sobre substratos nanoestructurados.
- Estudios 3D de proteínas de interés farmacológic como dianas de drogas.
- Caracterización de hidrogeles de péptidos.
- Estudio ultraestructural de models biológicos de enfermedades, por ejemplo, parásito de la malaria infectando el eritrocito o cambios estructurales en célula tumoral…
- Estudio de los cambios ultraestructurales provocados en las células por ensayos con drogas o modificaciones genéticas várias.
Enlaces de interés: