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11.08.2019

Publicación del protocolo "Cryo-transmission Electron Microscopy of Outer-inner Membrane Vesicles Naturally Secreted by Gram-negative Pathogenic Bacteria"

La Dra. Lidia Delgado, responsable de la Unidad de criomicroscopía los CCiTUB, ha publicado, junto con profesores del Departamento de Sanidad, Biología y Medio Ambiente de la Facultad de Farmacia de la UB y de la División de nanoscopía de la Universidad de Maastricht, el artículo "Cryo-transmisión Electron Microscopy of Outer-inner Membrane Vesicles Naturally Secreted by Gram-negative Pathogenic Bacteria" en la revista de protocolos Bio-protocolo (Acceso libre para la comunidad de investigadores).

Desde la propia publicación, se ha invitado al grupo de investigación a detallar el protocolo de preparación que se hace habitualmente para cryo-TEM debido a su expertessa técnica y al impacto que tienen los artículos sobre vesículas de membranas previamente publicados por el grupo donde se ha utilizado este protocolo.

Las vesículas de membrana bacteriana tienen implicaciones para la secreción de proteínas, lípidos, ARN, ADN y otras moléculas efectoras. Esta capacidad de interactuar e ingresar a las células huésped ha llevado al desarrollo de un campo de investigación en expansión que explora posibles aplicaciones clínicas y biotecnológicas.

La criomicroscopía electrónica es muy útil en la caracterización estructural de las vesículas de membrana porque la preservación alcanzada se considera la más cercana a cómo estaría la muestra en su ambiente, evitando así los artefactos típicos de otros métodos de preparación para microscopía electrónica de transmisión convencional a temperatura ambiente. Esto se consigue gracias a una crioimmobilización, que permite transformar el agua de la muestra directamente en gel vítreo evitando la formación de cristales, seguida de una observación de la muestra a temperaturas criogénicas.

Esta publicación detalla todo el proceso de preparación optimizado para este tipo de muestras, que es la parte más crítica para obtener buenos resultados y la que no se suele explicitar en detalle en los artículos habituales. De esta manera podría ayudar a otros laboratorios que necesiten llevar a cabo criomicroscopía electrónica de vesículas de membrana bacteriana o de otro tipo de sistemas membranosos, tales como vesículas extracelulares, liberadas por organismos de cualquier dominio de la vida (Eukarya, Archea, bacteria) y que se considera que intervienen como comunicasomes entre células; así como también de liposomas u otras formulaciones lipídicas, que se utilizan en sistemas de vehiculización de fármacos.

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