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La biolística se basa en el bombardeo de partículas mediante una pistola de helio. Es un método físico directo de transfección o de introducción de marcajes. Las macropartículas de oro o tungsteno se recubren con DNA, siRNAs o colorantes lipofílicos y se disparan contra la muestra atravesando las membranas celulares y penetrando así en las células. El método es viable para numerosos tipos de tejidos, órganos y células, en experimentos tanto in vitro como en animal in vivo; pero también permite el marcaje de tejido previamente fijado.
El método tiene diversas aplicaciones entre las cuales podemos citar:
• Marcaje de neuronas fijadas en secciones o cultivos organotípicos de hipocampo, estriado, corteza, permitiendo visualizar toda la arborización axonal y dendrítica en muy poco tiempo y así facilitar el análisis relacionado con los cambios en la espinogénesis y morfología de espinas. Del mismo modo, se puede utilizar para marcar cualquier otro tipo de tejido.
• Como método de transfección, es altamente eficaz (hasta> 90%), incluso en el caso de cotransfecciones con múltiples genes (los proyectiles se pueden recubrir con múltiples vectores). Es especialmente indicado con células resistentes a la transfección, como son los cultivos de neuronas o cualquier tipo de cultivo primario. En procesos de diferenciación, permite poder transfectar las células únicamente cuando han alcanzado el nivel de diferenciación que de desea.
• Método de transfección en animales vivos, embriones o en cultivos organotípicos. Se puede utilizar en cerebros vivos, tumores, hígado, bazo, riñón, páncreas… para aplicaci-ones de microscopía intravital, optogenética…
25 y 26 de Abril de 2017.
Preu: Acceso libre, requiere registro previo. Para más información contactar con confomed@ccit.ub.edu.
Microscopía Óptica Avanzada - CCiTUB
Universitat de Barcelona
Facultat de Medicina
5na planta - Ala Sud
C/Casanova 143
Barcelona 08036
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Martes 25 de Abril, 2017:
10:00-10:10 - Welcome
10:15-10:45 - Xavier Alba, Bio-Rad (Topic: Introduction to Biolistic techniques)
10:45-11:15 - Verónica Brito, DiOlistic Labeling of Neurons in Tissue Slices. Dept. de Biomedicina. Facultat de Medicina. Universitat de Barcelona - IDIBAPS
11:15-11:45 - Miquel Bosch, Transfection of organotipic brain slice cultures for fluorescence time-lapse neuronal imaging. Institute for Bioengineering of Catalonia (IBEC)
GROUP1
12:30-14:00 - Practical Session Preparation of coated "Bullets”(Verónica Brito, BioRad, Groups 5-10 participants)
15:00-16:30 - Practical Session Delivery and Observation (Verónica Brito, BioRad, Groups 5-10 participants)
Miércoles 26 de Abril, 2017:
GROUP2
9:30-11:00 - Practical Session Preparation of X-coated “Bullets”(Verónica Brito, BioRad, Groups 5-10 participants)
11:00-12:30 - Practical Session Delivery and Observation (Verónica Brito, BioRad, Groups 5-10 participants)
GROUP3
14:00-15:30 - Practical Session Preparation of X-coated “Bullets”(BioRad, Groups 5-10 participants)
15:30-17:00 - Practical Session Delivery and Observation (BioRad, Groups 5-10 participants)
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